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色譜分離zui常見(jiàn)問(wèn)題是峰形、分離狀況、洗脫時(shí)間或性能改變。可以分兩個(gè)步驟來(lái)處理不可接受的色譜分離。首先，從色譜方面來(lái)評(píng)價(jià)存在的問(wèn)題，其次，對(duì)產(chǎn)生問(wèn)題的原因進(jìn)行獨(dú)立分析。
評(píng)價(jià)色譜分離時(shí)使用標(biāo)準(zhǔn)品而不是樣品。每次進(jìn)樣時(shí)應(yīng)該做好樣品的特性和色譜性能記錄，這樣需要作比較時(shí)能夠提供歷史數(shù)據(jù)。
下面小編為大家?guī)?lái)導(dǎo)致色譜分離改變的zui常見(jiàn)原因及應(yīng)采取的解決方法：
1.系統(tǒng)不平衡
使色譜柱和檢測(cè)器有足夠的平衡時(shí)間。如果進(jìn)行梯度分析，兩次分析之間，平衡時(shí)間要充足。
*次使用離子對(duì)試劑，要保證用充足的時(shí)間和充足的流動(dòng)相沖洗色譜柱，以達(dá)到充分平衡。
2.梯度分析時(shí)未經(jīng)充分平衡
在兩次梯度分析間應(yīng)有足夠的平衡時(shí)間。進(jìn)樣要保證是初始時(shí)間的流動(dòng)相組分流經(jīng)色譜柱。未經(jīng)充分平衡時(shí)會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的保留時(shí)間。
3.泵壓力/運(yùn)行故障
參考流量曲線圖，找出原因并糾正。
4.室溫變化
保證儀器周圍溫度穩(wěn)定并達(dá)到平衡。如果無(wú)法達(dá)到溫度穩(wěn)定，或者不能達(dá)到平衡，建議使用色譜柱溫箱，柱溫箱系統(tǒng)應(yīng)*將色譜柱封閉。確保預(yù)先混合的溶劑能互溶，且流動(dòng)相已經(jīng)混合均勻。
5.進(jìn)樣體積太大、濃度太高
減小進(jìn)樣體積或稀釋原始樣品（注：使用弱溶劑，進(jìn)樣體積可增至約為柱體積的10%，使用強(qiáng)溶劑進(jìn)樣體積能達(dá)到柱體積的1%）。
6.色譜柱被污染
用一根性能已知的色譜柱換下被污染的色譜柱，并進(jìn)行一系列標(biāo)準(zhǔn)樣品分析，比較保留時(shí)間，如果保留時(shí)間重復(fù)，表明原色譜柱已被污染。清洗色譜柱或更換新色譜柱。
快速指南：1.引起保留時(shí)間變化的zui常見(jiàn)原因是系統(tǒng)不平衡，開(kāi)始分析前，系統(tǒng)必須平衡好。2.分析過(guò)程中溫度改變是保留時(shí)間變化的另一主要原因。3. 建議在等度分離中盡量預(yù)先混合好流動(dòng)相。
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